HPLC – Pengertian, Fungsi, Prinsip Kerja, Cara Menggunakan

HPLC atau High Performance Liquid Chromatography adalah salah satu teknik analisa sample dengan metode kromatografi. Teknik kromatografi ini sangat umum digunakan di laboratorium farmasi, laboratorium kimia maupun laboratorium biologi. PT. Andaru Persada Mandiri sebagai distributor alat laboratorium yang jual HPLC TKDN BARCOV HPLC BRQ-4000. Untuk diskusi detail bisa menghubungi whatsapp 087777277740. Pada artikel kali ini kita akan membahasa mengenai Pengertian HPLC, Fungsi HPLC, Prinsip Kerja HPLC, Jenis-jenis HPLC, Bagian-bagian pada HPLC, Cara Menggunakan HPLC, Keunggulan HPLC, Spesifikas Teknis HPLC, Demo Unit HPLC, Harga HPLC, Istilah Dalam HPLC, Gambar HPLC, Video Singkat HPLC.

Artikel HPLC ini cocok bagi pelajar atau mahasiswa yang sedang mencari informasi lengkap mengenai HPLC. Bagi anda yang berniat membeli alat HPLC juga bisa mempelajari spesifikasi secara detail atau melihat demo unit yang tersedia. Yuk kita mulai artikelnya!

Pelajar, mahasiswa atau orang baru di laboratorium mungkin akan kebingungan dengan singkatan HPLC. Beberapa bahkan memilki banyak pertanyaan di benaknya, mengenai  :

1. Apa itu HPLC?
2. Apa fungsi HPLC?
3. Bagaimana mekanisme kerja HPLC?
4. Bagaimana cara menggunakan HPLC?

Mari kita bahas secara detail dimulai dari pengertian HPLC.

Pengertian HPLC (High Performance Liquid Chromatography)

Dilihat dari sudut pandang bahasa, HPLC berasal dari bahasa Inggris. Awalnya HPLC memiliki kepanjangan High Pressure Liquid Chromatography. Keempat suku kata tersebut jika diartikan perkata :

• High berarti tinggi
• Pressure berarti tekanan
• Liquid memiliki arti cairan, dan
• Chromatography merupakan suatu metode tentang pemisahan molekul.

Jika disimpulkan secara sederhana High Pressure Liquid Chromatography dapat diartikan sebagai suatu metode pemisahan molekul dengan media cair yang diberikan tekanan tinggi. Secara sederhananya saya ilustrasikan sebagai berikut :

Bayangkan anda memiliki segelas teh manis yang ingin diketahui seberapa banyak kandungan gula yang ada didalamnya, seberapa banyak kandungan teh yang ada. Bahkan secara lebih detail, ada berapa banyak prosentase kandungan kafein, teofilin, vitamin A, B dan C. Nah, alat HPLC ini bisa digunakan untuk menganalisa seberapa banyak prosentase zat-zat tersebut pada suatu sample.

Seiring dengan perkembangannya, HPLC(High Pressure Liquid Chromatography) bertransformasi menjadi High Performance Liquid Chromatography. Hingga kini beberapa diantara kita lebih familiar dengan istilah High Performance Liquid Chromatography atau disingkat dengan sebutan HPLC.

Oh ya, saat ini istilah HPLC sudah merujuk kepada sebuah alat laboratorium analitika atau bisa juga disebut instrumen laboratorium. Tentu saja pembahasan pada artikel ini merujuk pada alat HPLC.

Kembali ke pembahasan tentang Pengertian HPLC, beberapa sumber di internet umumnya membahas tentang alat yang satu ini. Salah satunya dikutip dari wikipedia indonesia tentang pengertian HPLC adalah : sumber

HPLC merupakan salah satu teknik kromatografi untuk zat cair yang biasanya disertai dengan tekanan tinggi.

Dari kutipan singkat tersebut tentu kita mengerti, bahwa HPLC sangat erat kaitannya dengan kromatografi. Apa  itu kromatografi?

Pengertian Kromatografi

Kromatografi adalah sebuah teknik atau metode pemisahan molekul yang didasarkan pada perbedaan pola pergerakan antara fase gerak dan fase diam. Kromatografi digunakan untuk memisahkan komponen (berupa molekul) yang berada pada suatu larutan.

HPLC adalah alat laboratorium yang bekerja dengan metode fisikokimia, didasarkan pada teknik kromatografi dimana fase geraknya berupa cairan dan fase diamnya bisa berupa bentuk padat ataupun cair.

Dalam proses memahami kromatografi, anda sebagai pembaca kedepannya perlu memahami hal-hal lainnya yang memang berhubungan secara langsung dengan alat ini, seperti :

• Fase gerak dan fase diam
• Polar dan non polar
• Fase normal dan terbalik.

Pengertian HPLC (Lanjutan)

Balik lagi ke pembahasan tentang pengertian HPLC. HPLC adalah sebuah alat laboratorium spesifik(specific laboratory equipment) yang penggunaanya membutuhkan keahlian khusus, penggunaan alat ini dipastikan selalu menggunakan sample cair atau sample yang sudah dipreparasi sebelumnya. Adapun hasil analisa yang diperoleh akan ditampilkan dalam bentuk grafik atau kromatogram.

HPLC merupakan alat laboratorium yang bisa dikonfigurasi  sesuai dengan kebutuhan, karena terdiri dari module-module yang berbeda. Bisa saja anda menemukan HPLC dengan konfigurasi yang sangat sederhana dengan manual injector. Bisa jadi juga anda menemukan HPLC dengan konfigurasi yang sudah dilengkapi autosampler.

Suatu saat mungkin anda juga akan mengenal alat Gas Chromatorgraphy, atau biasa disingkat GC. Alat ini memiliki hubungan yang dekat dengan HPLC. Salah satu keuntungan menggunakan HPLC dibandingkan dengan GC ialah lebih stabil untuk menganalisis sample yang tidak mudah menguap(unvolatille).

Jika diantara anda para pembaca, belum memahami tentang alat HPLC hanya dengan membaca pengertiannya saja. Sabar! anda tidaklah sendiri. Penulis ketika pertama kali memahami alat ini di bangku kuliah juga butuh beberapa hari. Semoga dengan adanya artikel lengkap tentang HPLC ini, bisa membantu anda yang sedang mencari informasi Pengertian HPLC atau file HPLC pdf. Yuk kita lanjut ke fungsi HPLC.

Butuh HPLC : Hubungi 087777277740.

Fungsi HPLC (High Performance Liquid Chromatography)

Pada sub pembahasan kali ini, kita akan menjawab pertanyaan “Apa fungsi HPLC?”

Jika mungkin diantara pembaca ada yang sudah expert dibidang laboratorium dan sering menggunakan alat HPLC. Silahkan ikut berkomentar di bawah ya, jika terdapat penjelasan yang lebih mudah dipahami.

Penggunaan alat HPLC sangat erat kaitannya dengan dunia industri obat dan makanan. Fungsi HPLC adalah untuk menentukan atau mengukur atau menganalisa kadar bahan aktif  pada suatu sample(obat, makanan, herbal ataupun yang lainnya). Pada beberapa kasus yang berhubungan dengan obat herbal, alat ini digunakan untuk menentukan marker pada suatu obat herbal.

Dari sekian banyak alat-alat laboratorium yang pernah anda gunakan, masih ingatkah anda beberapa uji kompetensi saat kuliah. Misalnya ketika anda diharapkan mampu melaksanakan prosedur dan teknik ekstraksi, isolasi dan pemurnian serta karakterisasi awal senyawa metabolit sekunder tumbuhan obat. Sebut saja senyawa piperin dari merica hitam. Terdapat banyak alat laboratorium yang perlu anda gunakan, diantaranya :

1. Rotary Evaporator
2. Timbangan Analitik
3. Spektrofotometer
4. Kolom kromatografi
5. Hotplate. dan lainnya

Pada point nomor empat, terdapat kolom kromatografi.  Memang bukanlah alat yang sama dengan HPLC, namun bermula dari sinilah kita akan memahami apa itu fungsi HPLC. Jika pada kolom kromatografi hanya memanfaatkan gravitasi untuk proses pemisahannya, pada alat  HPLC terdapat pompa yang memberikan tekanan pada proses pemisahan. Selain tekanan atau pressure, ada beberapa aspek lagi yang perlu diperhatikan, seperti : suhu atau temperature dan interval waktu.

Analogi Sederhana Fungsi HPLC

Supaya masuk dengan kondisi saat ini, penulis coba buatkan analogi sederhana ya. Supaya anda ada gambaran tentang fungsi HPLC. Misalnya terdapat sebuah obat bernama decol**n, pada komposisi bungkus obat tersebut tertulis komposisi :

• Paracetamol 400mg
• Phenylpropanolamine HCL 12,5mg
• Chlorphenamine Maleate 1mg

Dengan menggunakan alat HPLC seorang laboran berpengalaman bisa saja melakukan serangkaian kegiatan untuk mengecek detail komposisi dari obat tersebut. Apakah benar kandungan senyawa pada obat tersebut sesuai dengan yang tertulis pada komposisi? Adapun proses dan tahapannya mungkin saja berbeda antara sample yang satu dengan sample yang lainnya. Semoga dengan analogi sederhana tersebut pembaca memahami bahwa fungsi HPLC digunakan untuk mengukur kadar suatu zat pada suatu sample.

Fungsi HPLC di Berbagai Laboratorium

Alat laboratorium HPLC(High Performance Liquid Chromatography) memiliki berbagai fungsi dan sering digunakan untuk pengujian yang beragam di laboratorium. Berikut adalah beberapa penggunaan umum HPLC dalam laboratorium:

1. Analisis Farmasi – Dalam industri farmasi, HPLC digunakan untuk menguji keberlanjutan dan konsentrasi bahan aktif dalam obat-obatan. Ini membantu memastikan bahwa obat memiliki kadar yang tepat dan aman untuk konsumsi manusia.
2. Analisis Kimia Analitis – Dalam laboratorium kimia analitis, HPLC digunakan untuk pemisahan, identifikasi, dan kuantifikasi senyawa kimia dalam berbagai sampel, termasuk dalam bidang lingkungan, makanan, minuman, dan lainnya.
3. Penelitian Ilmiah – Dalam penelitian ilmiah, HPLC digunakan untuk memisahkan dan menganalisis berbagai senyawa, seperti protein, asam amino, dan metabolit sel dalam berbagai contoh biologis.
4. Pemantauan Lingkungan – HPLC digunakan dalam laboratorium lingkungan untuk mendeteksi dan mengukur kontaminan dalam air, tanah, udara, dan sampel lingkungan lainnya. Ini membantu dalam pemantauan kualitas lingkungan dan kepatuhan terhadap peraturan lingkungan.
5. Analisis Pangan dan Minuman – Dalam industri pangan dan minuman, HPLC digunakan untuk memeriksa keamanan dan kualitas produk. Contohnya termasuk deteksi residu pestisida, analisis vitamin, dan identifikasi aditif makanan.
6. Analisis Klinis – Dalam laboratorium klinis, HPLC digunakan untuk menganalisis komponen-komponen biokimia dalam sampel darah, urin, dan cairan tubuh lainnya. Ini membantu dalam diagnosis penyakit dan pemantauan terapi.
7. Penelitian Biofarmasi – Dalam penelitian biofarmasi, HPLC digunakan untuk mengkarakterisasi obat dan formulasi farmasi, serta mempelajari kinerja sistem pengiriman obat.
8. Analisis Forensik – Dalam laboratorium forensik, HPLC digunakan untuk mendeteksi dan mengidentifikasi senyawa yang berkaitan dengan kasus kriminal, toksikologi, dan analisis forensik lainnya.

Gimana?

Sekarang tentu anda sudah paham apa pengertian HPLC dan apa fungsi HPLC. Yuk kita lanjutkan pembahasan ke prinsip kerja HPLC.

Prinsip Kerja HPLC (High Performance Liquid Chromatography)

Pembahasan pada sub point ini akan menjawab pertanyaan  : “Bagaimana prinsip HPLC?”

Seperti yang sudah disampaikan pada point sebelumnya, bahwa HPLC adalah alat laboratorium yang bekerja dengan metode fisikokimia, didasarkan pada teknik kromatografi. Terdapat dua fase yang perlu anda ketahui, yakni :

1. Fase gerak, dan
2. Fase diam

Secara sederhana HPLC bekerja mengacu pada metode fase gerak(mobile phase) dan fase diam(stationery phase), namun secara detailnya tentu ada banyak hal yang dilakukan pengukuran.

Berikut adalah gambaran sketsa alat hplc dengan bagiannya masing-masing :

Oke, dari gambar di atas tentu anda bisa melihat sendiri bagian bagian pada HPLC. Terdapat Solvent Bottles, UV-Vis Detector, Autosampler, Pump dan Column Compartment.

Tahapan Prinsip Kerja HPLC 

Zat pelarut atau yang dikenal dengan istilah solvent akan disimpan pada solvent bottle atau solvent organizer dan terhubung dengan inlet maupun outlet dari modul lainnya. Adapun sample yang sudah dipreparasi bisa disuntikan dengan cara manual ataupun menggunakan autosampler.

Modul pompa akan memberikan tekanan yang besar dan stabil untuk mendistribusikan atau mengalirkan solvent hingga melewati detektor dan berakhir di waste reservoir. Selama proses tersebut terjadi recording base line. Pada tahap ini pengguna bisa mengamati tingkat kestabilan base line sebelum sample disuntikan atau analisis dengan autosampler dijalankan.

Column oven akan mengkondisikan suhu supaya temperatur solvent maupun sample berada pada range yang sesuai. Di lain modul, detector UV-Vis melakukan recording ketika base line maupun ketika sample sudah diinjeksikan dan melewati kolom. Berbagai pengaturan maupun setting pada instrument HPLC biasanya dikendalikan oleh pengguna melewati software atau antar muka GUI. Output dari hasil pemeriksaan yang ditangkap oleh detector akan ditampilkan dalam bentuk grafik di komputer.

Gimana, sudah terjawab kan pertanyaan Bagaimana cara kerja HPLC atau prinsip kerja HPLC?

Tenang saja prinsip kerja HPLC ini hanya sebagai pengetahuan saja. Sebagai seorang user biasa anda tidak perlu mengetahui sampai detail berapa tekanan dasar, tekanan puncak ataupun, laju aliran dan temperatur kolom. Kecuali memang anda seorang teknisi atau produk spesialis yang memang perlu mengulik hingga dalam semua sistem yang bekerja pada sebuah HPLC.

Jenis Jenis HPLC – High Performance Liquid Chromatography

Oke, sekarang kita lanjut ke jenis-jenis HPLC  ya. Menurut penulis pengelompokan HPLC berdasarkan jenisnya agak sulit dilakukan. Tidak seperti mikroskop yang memiliki berbagai jenis, seperti :

1. Monokuler
2. Binokuler, dan
3. Trinokuler

Atau seperti water bath yang memiliki 2 jenis, seperti :

1. Analog, dan
2. Digital

Pengelompokan HPLC sulit dilakukan, karena memang berupa alat laboratorium spesifik(spesific laboratory instrument). Beberapa alat laboratorium spesifik lainnya seperti PSA(Particle Size Analyzer) atau GC(Gas Chromatorgraphy) juga sulit dilakukan pengelompokan berdasarkan jenis. Hal yang memungkinkan dijadikan acuan terhadap jenis HPLC adalah konfigurasinya. Alat HPLC sendiri merupakan alat yang terdiri dari beberapa modul yang saling berhubungan, seperti :

• Solvent Organizer
• High Pressure Pump (Isocratic, Quaternary atau Binary)
• Auto Sampler
• Column Oven
• Detektor UV-Vis ataupun yang lainnya

Dari beberapa modul diatas, alat HPLC bisa di konfigurasi sesuai dengan kebutuhan. Beberapa konfigurasi alat tersebut biasanya seperti :

• HPLC/UHPLC BRQ-4000 QUATERNARY MANUAL UV-VIS DETECTOR BASIC
• HPLC/UHPLC BRQ-4000 QUATERNARY MANUAL UV-VIS DETECTOR
• HPLC/UHPLC BRQ-4000 QUATERNARY AUTOSAMPLER UV-VIS DETECTOR
• HPLC/UHPLC BRQ-4000 QUATERNARY AUTOSAMPLER DIODE ARRAY DETECTOR
• HPLC/UHPLC BRQ-4000 QUATERNARY AUTOSAMPLER UV-VIS AND DIODE ARRAY DETECTOR
• HPLC/UHPLC BRQ-4000 QUATERNARY MANUAL UV-VIS AND DIODE ARRAY DETECTOR
• HPLC/UHPLC BRQ-4000 QUATERNARY AUTOSAMPLER UV-VIS AND FLUORESCENCE DETECTOR
• HPLC/UHPLC BRQ-4000 QUATERNARY AUTOSAMPLER UV-VIS FLUORESCENCE DETECTOR AND ELSD DETECTOR
• HPLC/UHPLC BRQ-4000 QUATERNARY AUTOSAMPLER FLUORESENCE DETECTOR
• HPLC/UHPLC BRQ-4000 Preparative HPLC Autosampler Diode Array Detector Fraction Collector
• HPLC/UHPLC BRQ-4000 QUATERNARY AUTOSAMPLER DIODE ARRAY DETECTOR AND REFRACTIVE INDEX DETECTOR

Semoga para pembaca jadi mengetahui tentang jenis HPLC dalam bentuk konfigurasinya. Step selanjutnya, kita akan mengenal bagian bagian HPLC.

Bagian Bagian HPLC  – High Performance Liquid Chromatography

Mengacu pada point pembahasan sebelumnya, mengenai modul-modul yang terdapat pada alat HPLC. Berikut ini adalah letak modul-modul pada alat HPLC. Silahkan lihat gambar di bawah ini :

Yuk, kita coba ulas satu per satu.

High Pressure Pump HPLC

Pompa HPLC atau HPLC Pump merupakan komponen yang penting dari instrument yang satu ini. Pada umumnya beberapa pompa memiliki tekanan yang berkisar pada 6000psi, namun ada beberapa jenis pompa yang mampu memiliki tekanan hingga 9000psi. Hal ini tentu saja bisa merubah sesuai kebutuhan, pompa dengan tipe tekanan 9000 psi biasa digunakan pada UPLC (Ultra Performance Liquid Chromatography).

Pemilihan pompa yang sesuai bisa saja memberikan dampak yang besar dari setiap aplikasi, bukan hanya waktu yang lebih singkat tapi juga penggunaaan solvent berkurang dengan signifikan. Berikut adalah beberapa gambar tentang pompa, pengaruh pompa HPLC terhadap waktu dan efisiensi.

Auto Sampler HPLC

Fungsi Auto Sampler pada HPLC sangatlah penting, terlebih jika anda memiliki banyak sample yang akan dianalisa. Presisi injeksi yang tinggi diperlukan dalam proses auto sampler, perubahan linearity yang luas diperlukan dari berbagai algoritma yang sudah ditanamkan pada software auto sampler.

Selain fitur auto sampler, sebetulnya HPLC memungkinkan menggunakan manual sampler juga. Pada tipe konfigurasi isocratic manual hal ini masih sering dilakukan, namun tetap saja dengan tipe auto sampler bisa mengurangi akumulasi sample yang terlalu banyak dan menghindari kontaminasi dari luar. Berikut adalah gambar dari auto sampler dan beberapa grafik tentang pengukuran auto sampler.

Column Oven HPLC

Column Oven pada HPLC berfungsi untuk menjaga suhu atau temperature pada range tertentu, hal ini dilakukan karena pengukuran nilai pada mobile phase bisa berubah pada suhu yang berbeda. Artinya, jika sample diberikan perlakuan yang sama pada suhu yang sama akan meningkatkan ke-akuratan proses pengambilan data.

Pada HPLC juga anda akan berhubungan dengan phase, orang sering juga menyebutnya fase, fase dalam HPLC ada dua jenis, yakni:

• Normal
• Terbalik

Pada fase normal yang menjadi fase diam adalah kolom yang bersifat polar, sedangkan fase geraknya non polar. Sedangkan pada fase terbalik, fase diamnya bersifat non polar dan fase geraknya polar. Polar pada umumnya memiliki sifat larut dalam air atau rantai karbon pendek seperti metanol, sedangkan non polar tidak larut dalam air atau rantai karbon panjang seperti C18.

Berikut adalah gambar Column Oven HPLC  dan mekanisme pemanasan sebelum masuk Column.

Detector HPLC

UV-Vis ternyata tidak hanya ada pada spektrofotometer, namun ada juga pada HPLC. Diatas adalah gambar dari modul UV-Vis Detector pada HPLC, mekanisme pengukuran dan hasil pengukuran dalam bentuk grafik seperti dibawah ini :

Cara Menggunakan HPLC  – High Performance Liquid Chromatography

Oke, pada point ini penulis akan sedikit mengulas tentang cara menggunakan HPLC. Langkah-langkah yang penulis buat mungkin saja sedikit berbeda dengan prosedur yang biasa anda lakukan di laboratorium, namun secara global masih sama. Untuk anda yang terbiasa menggunakan instrument yang satu ini, silahkan berikan masukan cara menggunakan HPLC di tempat anda ya.

Oh ya, mungkin saja terdapat perbedaan saat mengoperasikan alat labotarotium yang satu ini. Hal itu biasa, karena di pasaran negara Indonesia saat ini terdapat beberapa brand HPLC, seperti :

• Rittun
• Barcov
• Rigol, dan lainnya.

Persiapan Awal Sebelum Menggunakan HPLC

Berikut ini tahapan awal yang perlu dilakukan, sebelum menggunakan HPLC :

1. Lakukan persiapan sample yang yang akan dianalisa dengan menggunakan instrument ini, pastikan jumlahnya sesuai dan anda mengerti metode apa yang perlu digunakan.
2. Lakukan pengecekan kabel ke sumber daya(listrik). Pastikan setiap kabel sudah terhubung, baik komputer ke listrik, instrumen ke listrik atau komputer ke instrumen.
3. Jika dirasa tegangan listrik di wilayah anda tidak stabil, disarankan menggunakan stabilizer untuk memastikan sumber daya stabil.
4. Nyalakan komputer dan setiap modul pada alat HPLC. Perhatikan sejenak setiap modul dan komputer, apakah menyala dengan baik. Jika terdapat modul yang tidak menyala atau komputer tidak menyala, lakukan pengecekan kabel yang terhubung ke sumber daya.
5. Saat anda merasa sudah menyalakan instrument sesuai prosedur, namun tidak menyala. Tidak perlu menekan tombol power berulang kali, hubungi saja teknisi laboratorium anda.
6. Buka atau double click icon software yang HPLC di komputer anda. Lakukan pengecekan sederhana, apakah instrument dan komputer sudah saling terhubung dan bisa berkomunikasi. Pada beberapa kasus, jika instrument sudah terhubung dengan komputer ditandai dengan bunyi beep pada instrument.

Pengoperasian HPLC Dengan Sample

Perlu diketahui di awal, penggunaan HPLC dengan konfigurasi manual injector dan auto sampler memiliki sedikit perbedaan, namun masih dalam alur yang sama. Berikut ini adalah tahapan cara mengguna HPLC secara global :

1. Perhatikan pipa atau selang outlet sudah terletak pada penampung yang benar, karena ini penting untuk menampung limbah proses analisa.
2. Fokus ke software yang ada di komputer. Sebelum dan setelah menggunakan alat laboratorium ini, anda diharapkan melakukan flush atau purge atau dikenal dengan istilah pencucian kolom. Hal ini dilakukan agak kondisi kolom selalu dalam keadaan bersih dan tidak tersumbat. Pastikan membuka katup tekanan sebelum melakukan pembersihan kolom.
3. Perhatikan dan pastikan larutan yang digunakan untuk fase gerak tersedia dalam jumlah yang cukup. Beberapa jenis larutan yang digunakan diantaranya adalah : Asetonitril, Metanol atau Aquabidest.
4. Lakukan setting method pada software HPLC. Pada tahap ini anda diminta untuk melakukan setting detail mengenai aplikasi, komposisi dan waktu injeksi. Jika sebelumnya anda sudah memiliki method, tidak perlu membuat baru, gunakan saja yang sudah ada.
5. Operasikan instrument untuk mendapatkan base line yang stabil. Jika belum mendapatkan base line yang stabil, perhatikan langkah-langkah sebelumnya. Jika diantara anda ada yang masih pemula, mintalah seseorang yang lebih ahli untuk membantu dalam hal ini.
6. Pastikan tidak terdapat gelembung pada cairan fase gerak. Salah satu hal yang membuat base line menjadi tidak stabil adalah adanya gelembung. Beberapa jenis HPLC biasanya dilengkapi dengan degasser.
7. Setelah base line didapat, anda bisa mulai memasukan sample. Dengan cara injeksi manual atau auto sampler, itu tergantung konfigurasi dari alat anda. Kelebihan menggunakan auto sampler tentunya lebih otomatis dan presisi.
8. Detektor akan menangkap data dari sample dan menampilkannya di software. Pada beberapa kasus mungkin saja anda menemukan puncak ganda, dan belum langsung menemukan puncak tunggal pada chromatogram. Lakukan optimasi jika diperlukan.
9. Save atau print hasil pengukuran.

Tahapan Setelah Penggunaan HPLC

Beberapa hal yang perlu anda perhatikan setelah menggunakan alat laboratorium ini adalah :

1. Keluarkan vial dari auto sampler
2. Lakukan flush atau membersihkan kolom.
3. Mematikan instrument sesuai dengan alur yang ditetapkan. Jika perlu melakukan disconnecting instrument, lakukan itu terlebih dahulu sebelum menonaktifkan switch power.
4. Matikan komputer dan cabut sumber daya, jika tidak digunakan dalam waktu lama.
5. Tutup HPLC dengan cover atau case lainnya untuk mencegah debu dan kotoran menempel.

Oh ya,.. pada beberapa kasus sering ada yang bertanya : bagaimana cara membersihkan HPLC? tentu setelah membaca cara menggunakan HPLC ini, anda jadi mengetahui cara membersihkan HPLC yang benar. Sebelum dan setelah menggunakan melakukan flush kolom oven.

Demikian pembahasan tentang cara menggunakan HPLC. Semoga bisa memberikan gambaran bagi anda yang belum pernah menggunakan alat laboratorium ini. Pastikan membaca buku panduan atau manual book jika anda ingin mengetahui lebih detail masing-masing instrument.

Lebih teknis mengenai cara menggunakan HPLC bisa anda baca pada artikel : Cara Menggunakan HPLC Barcov BRQ-4000

Keunggulan Instrumen Barcov BRQ-4000

Berbicara tentang kelebihan suatu produk, tentu tidak terlepas dari fitur-fitur yang disematkan. Salah satu produk instumen HPLC yang kami rekomendasikan untuk berbagai keperluan karena kelebihannya adalah BARCOV HPLC BRQ-4000. Berikut adalah informasi lebih detail mengenai keunggulan BARCOV HPLC BRQ-4000 :

Fitur Utama

1. Tersertifikasi TKDN
2. Konfigurasi Fleksibel, sesuai dengan kebutuhan HPLC anda
3. Waktu injeksi yang cepat, efisiensi waktu analisa
4. Keamanan: Setiap Modul dilengkapi dengan sensor kebocoran
5. Kontaminasi yang rendah tiap injeksinya menghasilkan deteksi yang lebih akurat
6. Memenuhi FDA 21 CFR part 11, GMP, GLP dan terhubung dengan EyouLab CDS

Konfigurasi Aplikasi yang Fleksibel

Kombinasi Konfigurasi yang fleksibel dilengkapi dengan perangkat lunak dan aplikasi yang user friendly memastikan kemudahan pengoperasian dan peningkatan hasil uji analisa. Modul dan konfigurasi dapat ditingkatkan sesuai dengan kebutuhan

Tekanan yang Fleksibel

Pompa bertekanan tinggi sekitar ≥10500psi (72MPa). Terdapat berbagai jenis pompa seperti isokratik, biner, kuaterner, dan terner ganda. Gradien pompa yang lebih stabil dan seragam menjadikan sensitivitas yang lebih baik dan pengulangan kualitatif dan kuantitatif yang lebih presisi. Dapat mengalirkan hingga empat jenis pelarut berbeda yang dapat digunakan untuk berbagai metode pada penelitian dan pengembangan

Deteksi yang efisien dan fleksibel

Terdapat berbagai macam detektor seperti UV, UV-Vis, DAD, RID, FLD, ELSD, dan CD yang cocok untuk mendeteksi berbagai zat dengan sifat berbeda. Dapat menggunakan lebih dari satu detektor pada satu konfigurasi

Penanganan dan Peralihan Kolom yang Efisien

Oven kolom yang luas dapat menyimpan hingga 4 kolom berukuran 300 mm. Setiap kolom dapat langsung dioperasikan. Metode yang berbeda dapat dioperasikan secara otomatis tanpa memutus dan menyambungkan kembali kolom, yang berguna untuk perluasan metode kromatografi multidimensi. Desain sirkulasi udara yang dipatenkan membuat suhu internal lebih seragam dan menjaga stabilitas suhu ± 0,1 ℃.

Analisis Sampel yang Efisien

Sampler otomatis memberi Anda fleksibilitas. Pengulangan injeksi yang tinggi RSD kurang dari 0,3%, dikombinasikan dengan beberapa mode injeksi, memberikan jaminan untuk memperoleh hasil kuantitatif yang akurat. Pencucian jarum internal dan eksternal secara komprehensif mengurangi sampel sisa hingga kurang dari 0,0025%. Terdapat opsional pendingin yang cocok untuk sampel sampel biologis

Kontrol eksperimen analitis yang efisien

EyouLab CDS adalah generasi baru sistem pemrosesan data kromatografi yang memenuhi standar FDA 21 CFR Bagian 11, GMP, dan GLP dan persyaratan lainnya termasuk pencadangan otomatis, tanda tangan elektronik, jejak audit, dan IQ/OQ/PQ. EyouLab CDS menyediakan beberapa versi diantaranya versi enterprise, versi database, dan versi network

Spesifikasi Teknis BARCOV BRQ-4000

Pompa HPLC / HPLC Pump

Pump	Isocratic pump PU4012	Binary pump PU4020	Binary pump PU4022	Quarternary pump PU4040	Binary pump PU4025	Dual ternary gradient pump PU4060
Gradient Model	None	Binary high pressure gradient	Binary high pressure gradient Two 2-way solvent selector valves are standard	Quaternary gradient	Binary high pressure gradient Standard 2 sets of “2-way solvent selection valve”	Ternary gradient proportional valve Binary high pressure gradient
Max.Pressure	10,500 PSI（72MPa） (@0-2mL/min) 6,000 PSI（41MPa） (@2-5mL/min) 3,000 PSI（21MPa） (@5-10mL/min)				16,000 PSI（110MPa） (@0-2mL/min) 10,000PSI （67MPa）(@2-5mL/min)	10,500 PSI（72MPa） (@0-2mL/min) 6,000 PSI（41MPa） (@2-5mL/min) 3,000 PSI（21MPa） (@5-10mL/min)
Online Degassing	None	None	2-channel(480uL/channel)	4-channel(480uL/channel)	2-channel(480uL/channel)	6-channel(480uL/channel)
Optional Online Degassing			Optional  1-channel(480uL/channel)
Flow Rate Range	0.001 mL/min – 10.000 mL/min (increment 0.001mL/min)				0.001 mL/min – 5.000 mL/min (increment 0.001mL/min)	0.001 mL/min – 10.000 mL/min (increment 0.001mL/min)
Flow Rate Accuracy	±0.5% (@1mL/min，Water）
Flow Rate Precision	≤0.1%      (@1mL/min，Water) (JJG) ≤0.06% RSD (@1mL/min，Water) (ASTM)
Number of Solvent Lines	1	2	Binary gradient, but you can have 4 channels	4	Binary gradient, but you can have 4 channels	6
pH range	1.0~12.5(depend on column specification)
Pressure Pulsation	≤1% (@1mL/min,Water,>10Mpa)
Gradient Accuracy	None	±0.5%
Gradient Precision	None	≤0.2% SD
Safety Feature	Leak Detection
Size	550 mm(D)× 400 mm(W)× 180 mm(H)
Power	100 VAC – 240 VAC， 50/60 Hz, 150 Wmax
Weight	18 Kg	22 Kg	23 Kg	20Kg	25 Kg	24 Kg

Pengelola Sample HPLC / Autosampler HPLC

Auto sampler	AS4010	AS4050
Product	Standard Auto sampler	Large sample size
Sampling mode	Suction type (Full loop, Partial Loop & μL pick-up)
Volume of Sample loop	Standard 100μL; Optional：20 μL/50  μL	Standard 1000μL; Optional： 500 μL
Max. Sampling volume	Full loop= Loop volume;   Partial Loop=1/2 loop volume;  μL pick-up=(Loop volume-3*Needle valume)/2
Sample volume	2*54 1.5ml vials 108  (Standard), optional:96*2 well plate
Dosing pump volume	Standard 500 μL	Standard 1000 μL
Sampling Repeatability	Full loop≤0.3% RSD;   Partial Loop≤0.3% RSD (≥5μL) & ≤0.5% RSD (≥2μL);  μL pick-up≤1.0% RSD
Cross Contamination	<0.0025% (Fixed method and condition)
Pressure limit	6000 PSI optional: 9000 PSI
High pressure distribution valve	Standard 1 set, optional 2 sets for realizing SPE function
Cooling function	AS4010C (4℃- RT)	AS4050C (4℃- RT)
Interface	RS232; LAN
Size	550mm(D)× 400 mm(W)× 280 mm(H)
Power	100 VAC-240VAC, 50/60 Hz, 75 Wmax.
Weight	22 KG

Kolom Oven HPLC / Column Oven HPLC

Column Oven	Standard Heating CO4010		Heating & Cooling CO4012
Temp. control mode	Air circulation
Temp. Range	Ambient +5℃ – 85℃		Cooling  4℃ – 85℃
Temp Accuracy	±1.0 ℃
Temp stability	±0.1 ℃
Column capacity	Max. 4 * 300mm column
Column switch	Optional 2 sets for SPE or Muti-D Choromatography
Size	550 mm(D)× 150 mm(W)× 480 mm(H)
Power	100 VAC – 240 VAC， 50/60 Hz, 200 Wmax
Weight	15 Kg

Detektor HPLC / Detector HPLC UV-Vis

Detector	UV DE4008	UV-VIS DE4010
Light Source	Deuterium lamp	Deuterium lamp, Tungsten lamp
Wavelength	190 nm – 600 nm	190 nm – 900 nm
Spectral Width	8 nm
Wavelength Accuracy	±1 nm
Wavelength Precision	0.2 nm
Noise	±5.0×10-6   AU (JJG) ±3.5×10-6  AU (ASTM)
Drift	1×10-4  AU/Hr
Linear Range	>5×104 (JJG) >2.5AU (ASTM)
Max.Sampling Rate	100 Hz
Flowcell	Volume :12 μL， Light Path:10 mm，Max.pressure 1200 PSI
Detection Limit	5×10-9 g/mL（naphthalene）
Size	550 mm(D)× 400 mm(W)× 180 mm(H)
Power	100 VAC – 240 VAC， 50/60 Hz, 90 Wmax
Weight	11 Kg

Detektor HPLC / Detector HPLC DAD

Detector	DAD DE4020	DAD DE4022
Light Source	Deuterium lamp	Deuteurium lamp, Tungsten Lamp
Wavelength	190 nm – 640 nm	190 nm – 800 nm
Diode	1024 Pixels, 0.6nm/pixel
Spectral Width	6 nm
Wavelength Accuracy	±1 nm
Wavelength Precision	±0.1 nm
Noise	±1.0×10-5   AU（JJG） 0.75×10-5   AU（ASTM）
Drift	＜0.5×10-3  AU/Hr
Linear Range	>2.0AU (ASTM)
Max.Sampling Rate	100 Hz
Minimal Testing concentration	2×10-8 g/mL
Channel	12 CHS, full spectrum scan
Flowcell	Volume :2 μL， Light Path:10 mm，Max.pressure 900 PSI 12 μL， Light Path:60 mm，Max.pressure 900 PSI
Detection Limit	5×10-9 g/mL（naphthalene）
Size	550 mm(D)× 400 mm(W)× 180 mm(H)
Power	100 VAC – 240 VAC， 50/60 Hz, 90 Wmax
Weight	11 Kg

Setelah melihat spesifikasi dan technical parameter HPLC diatas, semoga anda memiliki gambaran produk HPLC yang paling ideal untuk kebutuhan anda di laboratorium.

Demo Unit HPLC – High Performance Liquid Chromatography

Berikut ini adalah beberapa foto demo unit yang tersedia di PT. Andaru Persada Mandiri. Untuk anda yang membutuhkan alat HPLC dan perlu diskusi sebelum melakukan pembelian, silahkan hubungi via whatsapp 087777277740 atau telepon : (0251) 7504679.

Lokasi via google maps : disini

Harga HPLC – High Performance Liquid Chromatography

Berapa kisaran harga HPLC tahun 2024 ini?

Tentu hal ini menjadi penting, terlebih jika anda ingin melakukan pembelian instrument yang satu ini. Ada beberapa hal yang mempengaruhi harga HPLC diantaranya :

• Fitur
• Spesifikasi
• Brand atau merk
• Layanan purna jual HPLC

Pada tahun 2024 ini kisaran harga HPLC berada antara : 500.000.000  hingga 1.800.000.000. Bahkan pada beberapa brand, harga hplc bisa lebih dari itu, misalnya saja 3.000.000.000 atau bahkan 5.000.000.000.

Beberapa daftar produk alat laboratorium HPLC yang paling direkomendasikan bisa ada lihat pada link : e-katalog

Karena HPLC merupakan salah satu alat laboratorium yang spesifik penggunaannya, jadi pastikan anda memahami konfigurasi yang paling sesuai dengan kebutuhkan anda. Termasuk juga dengan detektor yang anda perlukan. Namun jika saat ini anda sedang sangat membutuhkan alat HPLC  kami sarankan untuk berdiskusi dan melihat demo unit alat secara langsung. Anda dapat menghubungi customer service PT. Andaru Persada Mandiri sebagai distibutor alat laboratorium HPLC pada nomor whatsapp 087777277740.

Istilah Dalam HPLC – High Performance Liquid Chromatography

Beberapa istilah yang mungkin saja berhubungan ketika anda searching atau mempelajari HPLC, diantaranya:

1. High Performance Liquid Chromatography
2. KCKT
3. RP HPLC
4. HPLC pdf bahasa Indonesia

#1. High Performance Liquid Chromatography

Apa itu High Performance Liquid Chromatography? 

Jawab : merupakan kepanjangan dari HPLC. Instrument ini menggunakan salah satu teknik dari chromatography, atau dalam bahasa Indonesia adalah kromatografi. Kromatografi sendiri merupakan sebuah teknik atau metode pemisahan dan pengukuran molekul berdasarkan pola pergerakan antara fase gerak(mobile phase) dan fase diam(stationary phase). Beberapa instrument laboratorium yang sama-sama menggunakan metode chromatography selain hplc adalah:

• GC (Gas Chromatography)
• LC (Liquid Chromatography)

Untuk lebih memahami tentang hal ini, silahkan baca kembali point pengertian HPLC.

#2. KCKT

Apa itu KCKT?

Jawab : Merupakan singkatan dari Kromatografi Cair Kinerja Tinggi. Versi bahasa indonesia dari  High Performance Liquid Chromatography.

#3. RP HPLC

Apa itu RP HPLC?

Jawab : RP HPLC adalah Reverse Phase HPLC, atau sering juga disebut sebagai fase terbalik. Pada instrument ini terdapat 2 jenis fase, yakni fase normal dan fase terbalik. Pada fase terbalik, fase diamnya adalah non polar dan fase geraknya adalah polar. Untuk lebih mengetahui informasi tentang hal ini, silahkan baca kembali tentang pengertian HPLC.

#4. HPLC pdf bahasa Indonesia

Dimana bisa mencari artikel HPLC pdf bahasa Indonesia?

Jawab : Beberapa pengguna biasanya mencari artikel tentan HPLC pdf bahasa Indonesia, beberapa diantaranya mencari untuk bahan informasi atau pengetahuan seputar alat laboratorium. Banyak mahasiswa mencari file hplc HPLC atau bahkah ebook HPLC untuk dipelajari kembali. Pada dokumen tersebut biasanya tedapat berbagai pembahasan tentang instrumen yang satu ini, seperti :

• Kelebihan dan kekurangan hplc pdf
• Bagan hplc
• Bagian-bagian pada hplc
• Skripsi HPLC

Semoga dengan membaca artikel tentang HPLC ini, para pembaca menemukan informasi yang tepat tentang instrument tersebut.

Gambar HPLC

Berikut adalah beberapa gambar alat laboratorium HPLC yang mungkin saja anda perlukan untuk menyesuaikan dengan desain furniture laboratorium anda:

Yang perlu diperhatikan dalam memilih HPLC adalah bentuknya. Umumnya alat HPLC sebagian besar didominasi dengan tipe modular (lepas-pasang, konfigurasi custom). Untuk setiap module biasanya memerlukan 1 buah power supply, sehingga ketika anda memilih HPLC dengan tipe konfigurasi 4 module, sedikitnya perlu menyediakan 4 colokan listrik. Perlu tambahan mungkin untuk komputer, printer dan UPS. Pastikan terdapat terminal kabel/listrik atau menyedikannya sebelum instalasi berlangsung.

Video Singkat HPLC – High Performance Liquid Chromatography

Berikut adalah video singkat tentang HPLC :

Ditulis oleh : YAP

Demikian pembahasan tentang HPLC, yang berisi Pengertian HPLC, Fungsi HPLC, Prinsip Kerja HPLC, Jenis-jenis HPLC, Bagian-bagian pada HPLC, Cara Menggunakan HPLC, Keunggulan HPLC, Spesifikas Teknis HPLC, Demo Unit HPLC, Harga HPLC, Istilah Dalam HPLC, Gambar HPLC, Video Singkat HPLC. Demikian dan terima kasih.