Pengujian PAH – Jika pada artikel sebelumnya kita sudah bahas tentang Senyawa PAH (Polycyclic Aromatic Hydrocarbons) dalam Air maka sekarang kita akan bahas bagaimana Pengujian Senyawa PAH dalam Air menggunakan HPLC. PAH (Polycyclic Aromatic Hydrocarbons) adalah kelompok senyawa organik yang tidak mudah larut dalam air, terdiri dari dua atau lebih cincin aromatik yang terfusi. Sampah organik seperti tumbuhan, limbah pertanian, bahan bakar bumi, dan limbah industri dapat menjadi sumber pembentukan senyawa yang terbentuk melalui proses pembakaran tidak sempurna. Selain disebabkan oleh aktivitas manusia, PAH juga bisa terbentuk secara alami melalui letusan gunung berapi dan proses penguraian bahan organik di lingkungan. Keberadaan PAH di lingkungan perairan menjadi perhatian serius karena sifatnya yang persisten, bioakumulatif, serta berpotensi bersifat toksik, mutagenik, dan karsinogenik bagi organisme hidup.
Pemantauan kualitas air sangat penting untuk memastikan keamanan lingkungan dan kesehatan masyarakat. Beberapa aturan internasional telah menentukan batas tertinggi kadar PAH tertentu dalam air permukaan, terutama untuk senyawa yang termasuk karsinogenik seperti benzo[a]pyrene. Maka itu, diperlukan metode analisis yang mampu mendeteksi senyawa pada konsentrasi yang rendah, membedakan komponen secara akurat, serta bisa menganalisis berbagai jenis PAH secara bersamaan dalam satu kali uji. Salah satu cara analisis yang sering digunakan adalah High-Performance Liquid Chromatography (HPLC).
Prinsip dan Alat & Bahan
Pengujian kadar PAH dalam air menggunakan High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) berdasarkan prinsip pemisahan senyawa berdasarkan cara interaksi antara fase diam dan fase gerak di dalam kolom kromatografi. Sampel air terlebih dahulu mengalami proses ekstraksi atau pengkonzentrasi agar PAH dapat dipisahkan dari campuran air. Pemisahan dilakukan dengan menggunakan kolom fase terbalik (C18) yang diinjeksikan ke dalam sistem HPLC. Setiap senyawa PAH keluar dari kolom pada waktu retensi yang berbeda. Setelah senyawa tersebut terpisah, mereka dideteksi menggunakan detektor, yang menghasilkan kromatogram. Luas puncak kromatogram sampel diukur dan dibandingkan dengan kurva kalibrasi yang dibuat dari larutan standar untuk menentukan konsentrasi PAH dalam sampel.
Peralatan yang digunakan dalam pengujian, sebagai berikut:
- High-Performance Liquid Chromatography (HPLC)
- Corong pisah
- Rotary evaporator (rotavap)
- Vortex mixer
- Gelas ukur
- Gelas piala
- Kolom atau Kartrid SPE
- Vacuum Manifold atau Pompa Vakum
- Tabung Reaksi
- Botol Semprot
- Pipet mikro
- Syringe
- Vial
Bahan yang digunakan dalam pengujian, sebagai berikut:
- Asetonitril
- Standar PAH
- Aquadest
- Bahan SPE
Cara Kerja Pengujian PAH
Pembuatan fase gerak
- Campuran pelarut asetonitril dan air (60:40).
- Saring menggunakan vacuum filter, kemudian larutan ditampung dalam botol schott.
- Lakukan degassing selama 30 menit.
Pembuatan kurva standar
- Timbang standar PAH murni dan larutkan dengan pelarut di dalam labu takar.
- Siapkan deret standar PAH konsentrasi 0.1, 0.5, 1, 5, 10, 20 ppm.
- Tambahkan pelarut asetonitril sampai tanda batas.
- Saring setiap deret standar menggunakan filter membran 0,22 µm atau 0,45 µm
- Injeksikan deret standar ke alat HPLC dengan panjang gelombang 254 nm. Injeksikan pelarut asetonitril yang digunakan sebelum menginjek deret standar.
Preparasi sampel
- Sampel disaring dengan menggunakan filter 0,45 µm untuk menghilangkan partikel padat.
- Sampel dilewatkan melalui cartridge SPE untuk memisahkan PAH dari matriks air dan memekatkannya.
- Hasil ekstrak diuapkan hingga volumenya menjadi sangat kecil menggunakan rotary evaporator atau nitrogen cair, kemudian dilarutkan kembali dalam asetonitril.
- Sampel diinjeksikan ke dalam HPLC. Fase gerak campuran asetonitril dan air (60:40) membawa sampel melalui kolom fase terbalik. Senyawa PAH terpisah dari pengotor berdasarkan afinitasnya terhadap fase diam.
- Luas puncak sampel dibandingkan dengan kurva kalibrasi standar PAH untuk menentukan kadar kuantitatifnya.
Kesimpulan
Pengujian kadar PAH di air adalah langkah penting dalam upaya mengontrol pencemaran lingkungan dan menjaga kesehatan masyarakat. Sifat PAH yang bersifat persisten, hidrofobik, dan berpotensi karsinogenik menjadikannya sebagai salah satu parameter utama dalam pemantauan kualitas air. Kehadirannya dalam konsentrasi yang rendah namun berdampak besar memerlukan metode analisis yang peka, spesifik, dan mampu menghasilkan data yang tepat.
Penggunaan High-Performance Liquid Chromatography (HPLC), terutama yang dilengkapi dengan detektor fluoresensi, terbukti efektif dalam memisahkan serta mengukur berbagai jenis PAH secara bersamaan. Sistem kromatografi fase terbalik menggunakan kolom C18 memungkinkan resolusi yang baik antara senyawa PAH yang memiliki karakteristik kepolaran dan berat molekul yang berbeda. Selain itu, proses persiapan sampel seperti ekstraksi dan pemekatan memiliki peran penting dalam meningkatkan kemampuan metode mendeteksi zat.
Keunggulan metode HPLC terletak pada kemampuannya menghasilkan data dalam jumlah yang jelas, memiliki tingkat ketepatan akurasi dan presisi yang baik pemantauan lingkungan saat ini. Meskipun begitu, metode tersebut tetap perlu diverifikasi agar parameter seperti akurasi, presisi, recovery, dan batas deteksi memenuhi standar yang berlaku. Pengujian PAH dalam air menggunakan HPLC merupakan metode yang andal dan dapat diterapkan dalam analisis lingkungan.
Menerapkan metode ini tidak hanya membantu dalam penelitian dan pengawasan kualitas air, tetapi juga berperan dalam penyusunan kebijakan pengelolaan lingkungan yang didasarkan pada data ilmiah. Pengujian lingkungan yang terus berkembang bersamaan dengan kemajuan teknologi analitik, diharapkan akan menjadi lebih efisien, ramah lingkungan, dan mampu mendeteksi kontaminan pada konsentrasi yang semakin rendah untuk mendukung keberlanjutan lingkungan.
PT. Andaru Persada Mandiri adalah distributor alat laboratorium High Performance Liquid Chromatography (HPLC), jika anda membutuhkan High Performance Liquid Chromatography (HPLC) bisa menghubungi kami di whatsapp 087777277740 atau telepon 0251-7504679. Link alamat kami sertakan pada Google Maps.
Demikian artikel “Pengujian PAH (Polycyclic Aromatic Hydrocarbons) pada Air menggunakan HPLC“, semoga bermanfaat. Sekian dan terima kasih.
